化学发光法范文1

关键词：光谱分析法；概念；化学发展；重要作用

1 光谱分析法概念及优缺点

采用光谱学的基本原理与实验的方法来确定物质的基本结构与化学的组成成分的这一种分析方法我们习惯上称之为光谱分析法。具有各种各样结构的物质都具有自身的特征性光谱，光谱分析法就是采用特征光谱来研究物质的结构或者测定化学主要组成成分的一种方法。光谱分析法主要包括有原子发射光谱法、原子吸收光谱法、紫外和可见吸收光谱法以及红外光谱法等等诸多类型。按照电磁辐射的原理，光谱又可以分成分子光谱与原子光谱。光谱分析的方法开创了化学与分析化学的新的纪元，很多化学元素类型是凭借光谱分析的方法才被人们所发现的。该方法已经广泛地被用于地质、冶金、石油、化工、农业、医药、生物化学以及环境保护等等很多方面。光谱分析法也是近几年来发展比较迅速的痕量分析的一种方法，该种方法具有操作简单、快速、灵敏度高、精密度以及准确度好的特点，而且线形的有效范围很宽，检出限比较低。光谱分析法属于是一种经常被采用的具有灵敏、快速和准确优质特点的近代仪器分析的方法。它与其他分析的方法相比较起来有很多自身优点，分析的速度比较快，原子发射的光谱运用在炼钢炉之前的分析，能够在一到两分钟内，同时分析出二十几种元素的精确的分析结果；同时操作比较简单，有些样品都不用经过任何类型的化学性的处理，就能够直接对其进行光谱的分析，如果结合采用计算机技术的话，有的时候只需要简单地按一下键盘就可以自动进行相关的分析、数据性的处理以及打印出分析的精确结果。在采用毒剂报警或者大气污染相关检测等等方面，运用分子光谱法进行遥测，不需要采集样品，在短短的几秒钟时间内，就可以发出警报或者检测出污染的严重程度；不需要纯样品，只需要利用已知的谱图，就可以进行光谱的定性分析。这是光谱分析法的一个非常突出的特点；能够同时测定出多种元素或者化合物，省去了比较复杂的分离性操作的过程；选择性比较好，能够测定出化学性质相似的元素与化合物。比如测定铌、钽、锆、铪与混合性的稀土氧化物，它们的光谱线能够分开然而不受任何干扰，已经成为了分析这些种类化合物的非常得力的工具；灵敏度比较高，能够利用光谱分析法进行痕量的分析。现在，它的相对灵敏度能够达到千万分之一到十亿分之一；样品损坏比较少，能够用在古物或者刑事侦察等等相关领域当中；伴随着新的技术的广泛采用，进行定量分析的线性的范围变宽了，这样就使得高低含量各异的元素能够同时进行测定。还能够进行微区的分析。光谱定量的分析是建立于进行相对比较的基础之上的，一定要有一整套标准的样品来作为基准，并且要求的标准样品的组成与结构状态应该和被分析的样品要基本上一致，这在很多情况下都是比较困难的。

2 光谱分析法在化学发展中的重要作用

2.1 方法论意义

光谱分析法属于是对物质进行全面认识的一种全新的方法。在对物质进行光谱分析以前，人们主要是通过容量与质量分析的方法来对物质进行分析。然而这两种方式在发现稀有元素和对微量元素的含量进行有效分析等方面都显得无能为力，化学如果想要发展的话，亟待需要进行研究手段与方法的改革。1859年，著名物理学家基尔霍夫与化学家本生进行合作，建立起了第一台把光谱分析作为主要目的的分光镜，这就宣告了光谱分析方法的最终诞生。从此以后，初步上解决了对于化学物质进行细微的微观认识并且进行精确研究的这一难题，从而开创了采用物理的方法来研究化学相关内容的仪器分析的新的时期。

2.2 认识论意义

光谱分析法的最终出现体现了分析领域开始从单纯的经验上升到理论层面的开始，并且以此开创了光谱学。在这之后将近二百多年的时间内，人们对光谱进行深入研究的目的仅仅局限在发现光谱的扩充谱图，但是很少涉及到光谱和物体的结构之间的某些问题，所以能够认为这种对于光谱的相关研究还仅仅处于经验的认识阶段。自从基尔霍夫和本生发明了光谱分析的方法之后，这样就使得研究光谱的动力已经不单单限于来发现新的光谱，并且更加重要的是能够凭借分析光谱的方式来发现新的元素，从而使得光谱学从以往比较盲目的经验认识水平逐渐上升到比较系统的理论层面的研究，从而把认识的水平提高到了理性的新阶段。

2.3 辩证法意义

光谱分析的方法使得揭示物质相互之间的联系有了很大的可能性。由于光谱分析的方法能够深入到物质的内部，这直接反映出了原子结构、组成以及性质，而且准确度比较高，适用的范围比较广。所以，在我们鉴别元素的时候，它大多被用在发现新的元素。这样的话，随着新的元素的不断得被发现从而为揭示出物质的联系提供了很大的可能性。在光谱分析法被发现十年之后的1869年，门捷列夫可以提出元素的周期律，制订出元素的周期表，这在某种意义上能够说是得益于光谱分析法的广泛应用。光谱分析法使得经验的研究与理论的研究实现相互联系。科学的发现一定要以经验事实作为基本依据，但是单单依靠经验不能够达到科学研究的更高的阶段，要凭借理论思维。光谱学起源于对于光谱的经验进行广泛研究，基尔霍夫与本生归纳出了大量的实验结果，把发现的光谱和分析的物质结构和性质相互联系，这才创立了光谱分析的方法。除此之外，基尔霍夫侧重于对理论进行研究，然而本生侧重于对于经验进行研究，两人之间的合作本身就体现出了经验和理论间具有的必然联系，能够说光谱分析的方法搭建起了联系经验和理论之间的桥梁。光谱分析法同时也揭示出了微观世界和宏观世界的相互联系。凭借对光谱进行分析，不单单能够从宏观的物质当中分析出它所包含的微观方面的内容而且还能够把这种微观的内容用宏观的形式来表现出来，反映出了宏观和微观物质相互之间的统一性。光谱分析法很好地沟通了物理学、化学以及天文学之间的相互联系。一方面，光谱分析的方法是由物理学家基尔霍夫与化学家本生两人共同发明的，这也同时说明物理学和化学两类学科相互之间具有着天然的密切联系，值得两个学科的科学家们来共同配合进行研究。另一方面，在地球上存在的物体与天空当中的物体都已经发现了光谱，并且它们当中有很多都是相同的，这也就说明了地球和天空的物体并没有本质上的区别。所以，研究地球的物体性质的物理学和化学与对天体性质进行研究的天文学三者之间都存在着内在的统一性。

参考文献

[1]吴汉福.光谱分析技术的应用[J].六盘水师范高等专科学校学报， 2006.

[2]王桂清，刘敏娜.光谱分析技术的近代进展及其应用[J].综述与专论，2002.

化学发光法范文2

[关键词]化学发光免疫分析；免疫传感；快速检测

中图分类号：TP317 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2016）14-0049-01

近年来，化学发光免疫分析法备受人们的青睐，主要是因为此方法具有高灵敏度、强特异性、广适用面和设备简单等特点。在临床医学、食品药物等领域，此方法被广泛应用于抗原与抗体间的识别。生物分子的体积大、扩散率比较小，所加之对识别微电具有空间阻碍作用，所以受到传质速率和反应动力学控制的免疫反应速率一般都会比较低。传统的免疫分析方法需要的温育时间比较长，大大限制了样品测试的通量和适用范围。所以为了缩短免疫分析的时间，需要不断的进行技术创新，从而扩展化学发光免疫分析的应用范围。

一、化学发光免疫分析法

化学发光分析是一种利用化学反应产生的辐射光的强度来进行物质含量确定的分析方法。这种分析是化学发光系统和免疫反应的完美结合，主要是利用化学发光的相关物质对抗体或者是抗原进行标记，等到与需要进行测定的抗原或者抗体反应之后，再利用分离游离态化学发光物质的方法，使得加入到化学发光系统中的其他相关物产生化学发光，然后进行抗原或者是抗体的定量或者是定性的检测。在化学发光免疫分析中，主要使用4类标记物，分别是异鲁米诺及其衍生

物、过氧化物酶和碱性磷酸酶、鲁米诺和吖啶酯衍生物。在目前的化学发光免疫分析法中，以酶为标记物的化学发光是应用的主流。常用的标记酶是碱性磷酸酶和辣根过氧化物酶。利用酶来做标记物主要是因为酶具有相应的化学发光底物，在临床上的应用比较广泛。

在化学发光免疫分析方法中不可避免的会利用到标记技术，而标记技术是现代免疫分析的关键性技术之一。新的标记免疫分析技术，在目前的社会诸多领域中得到了广泛的应用，并且展示了非常不错的发展前景。在实际标记技术的应用中，纳米技术广泛的用于生物标记，主要是因为纳米粒子具有非常良好的生物相容性，而且具有信号放大的效果。在实际应用中，量子点就是一种半导体纳米颗粒，所以在发光免疫分析法中被大量的使用。

二、化学发光免疫分析法的应用

（一） 快速化学发光免疫分析方法

传统的免疫分析方法需要的时间比较长，而且由于时间的延长往往会导致免疫试剂吸附在管道的内壁上，这样就会造成不同测定间的信号交叉，对于测定结果的准确度具有严重的影响。为了实现免疫分析的高通量，克服传统方法的不足，可以通过利用外场的驱动或者是利用溶液来进行有效混合策略，以此来达到加快抗原或者是抗体等大分子的传质速率。在实际中，还可以通过提高整个反应体系的温度来进行免疫反应动力学的加速，这样也可以实现快速的免疫检测。

在提高传质速率的方法选择上，主要有四种备选方案，分别是改变电渗流、超声波驱动、电磁搅拌和电场驱动。通过这种提高传质速率的方法，可以有效的实现快速检测，一般在3分钟之内就可以完成检测工作。除去提高传质速率的方法，外力驱动的加速也会提高检测，在实际应用中，利用外力驱动的加速效果，可以在16分钟内完成整个测定分析工作。

（二） 多组分化学发光免疫分析方法

多组分化学发光免疫分析方法也是化学发光免疫分析方法的一种重要应用。在单个的分析流程中，同时实现多组分的检测，具有的优势非常显著。利用这种方法，不仅所需要的时间短、样品的消耗量比较少，而且分析的通量高，分析成本整体较低。这些优势都是免疫分析长期追求的目标，也是未来免疫分析的发展研究热点。多组分免疫分析模式主要有两种实践模式，分别是：多组分同时检测模式和顺序检测模式。在实际应用当中，同时检测模式往往会与空间分辨技术，还有阵列检测器同时进行结合检测，而顺序检测一般是在同一个时间期限内对多个组分进行分别检测。近年来由于安培免疫传感器阵列在多组分免疫分析中的广泛应用，多组分化学发光免疫分析的方法获得了非常快速的发展。多组分化学发光免疫分析法的广泛使用得益于其他技术的长足进步，也就是说多组分化学发光免洗分析的发展要建立在与其相关技术的发展基础上，所以这种技术在未来的发展潜力巨大。

（三） 高灵敏化学发光免疫分析方法

从过去的实践经验中得知，现有的检测手段其灵敏度和特异性都不是很理想，所以选择高灵敏度的检测方法越来越重要。纳米技术快速发展和在检测中的应用为实现化学发光免疫分析的高灵敏度提供了可能。就目前的情况而言，纳米粒子在生物分析中得到了广泛的使用，其信号放大的功效对于高灵敏免疫分析方法的构建非常有帮助。

通过研究发现不同粒径的纳米粒子可以增强鲁米诺过氧化氢体系的化学发光 ，在试验中，38 nm 粒径的纳米粒子的增强效果最为显著。通过实验，合成的特殊形状的不规则金纳米粒子，对鲁米诺过氧化氢化学发光体系的催化活性是普通纳米粒子的100倍。在试验中，将抗体固定在不规则金纳米粒子表面后发现，会形成夹心免疫复合物，这中复合物对于信号的放大，其效果更加的显著。也正是通过试验得知，将纳米粒子广泛应用于化学发光免疫分析中时，由于其信号放大的效果显著，测定分析的敏感性和准确度显著加强。

三、发展与展望

化学发光免疫分析方法在目前的生命科学领域、食品、药物的测定等方面被广泛的使用，而且随着我国对食品安全的重视程度不断加深，测定范围和深度肯定会逐渐增加。化学发光免疫分析方法其本身就具有成本低、操作简单、灵敏度较高、测定速度快等突出的优势，在未来的发展中这些优势会被充分的利用，化学发光免疫分析法的适用范围也会更加的广泛。再者，化学发光免疫分析法与技术的进步有着密切的关系，随着未来技术的不断进步，与化学发光免疫分析法相关的技术会得到不断地改进和发展，这对于化学发光免疫分析法来说，是一个强有力的助推力。

结束语

化学发光免疫分析方法因为其优势突出所以在目前的各个领域具有非常广泛的应用。在实际应用中，一定要不断的加深对此方法的认识深度，不断地提高利用此方法的技术，使这种技术更好的为现代的测定工作来服务。

参考文献

[1]汪晨，吴洁，宗晨，徐洁，鞠合.化学发光免疫分析方法与应用进展[J].分析化学，2012，01：3-10.

[2]金茂俊，邵华，金芬，王静.化学发光免疫分析方法的研究及应用[J].农产品质量与安全，2012，02：42-46.

[3]金茂俊，王静，杨丽华，杜鹏飞，邵华，金芬，王珊珊，佘永新.化学发光免疫分析方法在食品安全检测中的研究进展[J].食品安全质量检测学报，2014，03：840-845.

[4]肖勤，林金明.化学发光免疫分析方法的应用研究进展[J].分析化学，2015，06：929-938.

化学发光法范文3

关键词 流动注射；化学发光；鲁米诺；三聚氰胺

中图分类号 O657 文献标识码 A 文章编号 1673-9671-(2012)101-0172-01

三聚氰胺是一种三嗪类含氮杂环有机化合物，主要作为生产三聚氰胺甲醛树脂的原料，食品（如奶粉）中如加入三聚氰胺会造成其蛋白质含量增高的假象，长期食用含三聚氰胺的食品会对生殖能力造成损害、并诱发膀胱或肾结石等疾病，目前，测定三聚氰胺的方法有高效液相色谱法、气相色谱-质谱法、液相色谱-质谱法、毛细管电泳法、酶联免疫分析法等，而化学发光法的报道甚少。本文研究发现，在碱性介质中三聚氰胺对鲁米诺-过氧化氢发光体系有抑制作用，据此，结合流动注射技术建立了测定三聚氰胺的新方法，该方法操作简便、测定快捷、灵敏，可用于水样中三聚氰胺的测定，结果令人满意。

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

IFFL-D型智能流动注射化学发光分析仪（西安瑞科电子设备有限公司）；天子天平（北京赛多利斯仪器系统有限公司）。

鲁米诺储备液（1.0×10-2 mol/L）：准确称取0.443 g鲁米诺，用0.1 mol/L氢氧化钠溶液溶解转移并定溶于250 mL的棕色容量瓶中，摇匀，于4℃下避光保存7天后使用。

三聚氰胺储备液（10 mg/L）：准确称取0.005 g三聚氰胺，用少量甲醇溶解，用水将其转移并定容至500 mL容量瓶中，摇匀，使用时用水逐级稀释到所需浓度。

过氧化氢储备液：30% H2O2溶液，使用时逐级稀释。

以上所用试剂均为分析纯，所用水为二次去离子水。

1.2 试验方法

2 结果与讨论

2.1 实验条件的优化

2.1.1 鲁米诺浓度的选择

鲁米诺作为发光试剂，实验考查了鲁米诺浓度（2.5×10-5～1.75×10-4

mol/L）对化学发光强度的影响，当鲁米诺为1.0×10-4 mol/L时相对发光强度最大，且有**信噪比。

2.1.2 过氧化氢浓度的选择

过氧化氢溶液是此化学发光反应中的氧化剂，实验考察了过氧化氢浓度（4.0×10-5～4.0×10-4 mol/L）对化学发光强度的影响，实验表明，过氧化氢浓度为2.0×10-4 mol/L时?I最大，且具有**信噪比。

2.1.3 氢氧化钠浓度的选择

2.1.4 仪器负高压，流速，阀池距的选择

考察了负高压、阀池距、流速等测定参数对体系?I的影响，结果表明，当负高压为800 V，泵速为4.5 mL/min，输液管内径为0.8 mm，阀池距为8 cm时可获得最大的相对发光强度。

2.2 工作曲线

2.3 干扰试验

2.4 样品分析

由于实际水样中三聚氰胺含量很少，为了验证本实验方法的可靠性，对环境水样进行加标回收处理。取废水样200 mL于分液漏斗中，滤去杂质不溶物，稀硫酸调节pH为6左右，加入20 mL EDTA，取10 mL处理样品，用已建立的分析测定方法对三聚氰胺的进行测定。

参考文献

化学发光法范文4

关键词：电弧；原子发射光谱；银；锡；钼；硼；铅

中图分类号：TG115.33 文献标识码：A 文章编号：1674-098X（2016）01（a）-0000-00

银、锡、钼、硼、铅的测定往往要采用几种大型仪器才能完成，但由于分析步骤繁多，空白等影响因素，测定结果很难一致达到规定的要求。本文探讨了用交流电弧原子发射光谱法测定银、锡、钼、硼、铅，经一次激发，得到五个元素的分析结果，计算出精密度、准确度及检出限，得到了检出限低，精密度好，准确度高的指标，取得了较好的测定结果。

1实验部分

1.1 仪器和工作条件

1.1.1 光谱仪

AES-7200地址样品专用发射光谱仪（北京瑞利）：光栅刻线2400条/nm，光栅色散率0.55nm/mm（一级），波段范围200-400nm。

1.1.2 光源

WJD型交直流电弧发生器，前置稳压电源，380V，交流电弧。曝光：起弧电流5A，起弧5秒后电流升至15A保持30秒，一共曝光35秒。调整好上下电极的距离，使整批样品的激发保持一致。

1.1.3 电极规格

光谱纯石墨电极，上电极平头柱状，直径4mm，下电极细劲杯状，孔径5mm，壁厚0.8mm，孔深5mm，细颈颈长4mm，直径4mm。

1.2 样品的制备

1.2.1 缓冲熔剂的制备

根据多年相关研究资料[1-5]，为了使样品之间有尽量相似的基体，我们在样品中加入缓冲剂。缓冲剂成分为： ： ： ： =22：20：44：14（内含质量分数为0.007%的GeO2作内标），它不仅使被测定的样品有保持基本相同的弧烧温度，有更加相近的基体，还使得Mo、Pb等一些难激发元素更加容易挥发[1]。

1.2.2 混合样品的制备

称取粉碎好的待测样品0.1g与缓冲剂0.1g于玛瑙研钵中，研磨1min至均匀，用碾压的方法将混合样品装入带有凹槽的石墨下电极中，压紧，滴加2滴蔗糖溶液，于100摄氏度的烘箱中烘干待测。

1.3 标准系列

称取0.1g国家一级标准物质，并加入0.1g缓冲剂，放入玛瑙研钵中研磨至均匀，装入下电极中，压紧，加两滴蔗糖酒精水溶液，于100℃烘箱中烘干30分钟，以同样的方法制出标准系列。

1.4. 光谱分析方法

1.4.1标准试样法

此方法是在分析样品前先激发一系列标准样品制作标准曲线，测定的谱线强度与分析物的浓度存在一定的函数关系。曲线拟合成功后，分析待测样品，并将测得的强度值代入该函数式，计算出待测元素的含量。

1.4.2 持久曲线法

持久曲线法是先用标准试样制作一条校准曲线，以后每次分析样品时，只需要用标准化样品对标准曲线的漂移进行修正，然后就可直接测定样品，从修正过的曲线上求出含量。

2结果与讨论

2.1 曝光时间段选择[6]

称取国家标准物质GBW 07304a和缓冲剂各0.1g磨匀装入下电极，每隔5秒作元素的蒸发曲线（如图1），由图可知个元素的蒸发曲线基本一致。

称取11份国家一级标准物质GBW 07304a，分别与缓冲剂1：1磨匀制样，用不同的激发时间进行测定，得各元素不同激发时间对各元素强度的曲线（如图2），从图中可以看出，从5s到30s，各元素的激发强度值快速增大，35s之后趋于稳定，因此选择激发时间为35s。

2.2 背景的扣除

样品分析测定中，背景的存在，对分析结果有很大的影响，背景的不一致对测定结果的准确度产生了严重的影响。（如图3），分别是扣除了背景和没扣除背景条件下银的标准曲线，图中可以看出，扣除了背景后，曲线的线性发生了根本性的改善，得到了较好的精密度和准确度。

2.3 样品与缓冲剂的比例

发射光谱法测定银、锡、钼、硼、铅所用的缓冲剂，对于稳定弧烧、控制电弧温度和元素的蒸发行为，提高分析准确度、精密度和改善方法检出限有着非常重要的作用[5]。

缓冲剂比例太小，弧烧温度难以控制，元素激发不完全；缓冲剂比例过大，使得样品被过度稀释，准确度变差。本实验以缓冲剂、样品比例为0.5：1，1：1，2：1，3：1时，测定不同比例下的标准曲线（如图4），由图可以看出，缓冲剂、样品的比例为1：1时，被测元素的标准曲线有很好的线性度，所以在测定低含量样品时，选择缓冲剂、样品比例为1：1。考虑到比例为2：1时，可以提高银，锡的检测上限，并且有比较好的精密度，所以在测定高含量样品时可以选择缓冲剂、样品比例为2：1。

2.4方法检出限

按分析步骤称取0.6g人工合成基体与0.6g缓冲剂研磨均匀后，制备成12个样品进行测定，计算相应的标准偏差（S），以3倍标准偏差计算检出限（LD）。由表1可见，几种元素检出限分别为Ag/0.014 ug/g、Sn/0.25ug/g、Mo/0.12 ug/g、B/0.79 ug/g、Pb/0.70 ug/g，符合多目标地球化学调查样品测试及质量监控要求[5]。

2.5 方法精密度

精密度是指在规定的条件下，同一个均匀待测样品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度。精密度一般用偏差，标准偏差或相对标准偏差表示。

标准偏差：

使用本仪器对8个国家一级地球化学标准物质进行精密度试验，每个元素进行12个平行测定，计算相对标准偏差（RSD）。由表2可以看出，各元素相对标准偏差基本都小于10%。

2.6 准确度

准确度是指在一定条件下用该方法测定的平均值与真实值或参考值的符合程度。以误差来表示。在实际工作中通常用标准物质或标准方法进行对照试验来确定准确度。对国家8个一级标准物质中的Ag、Sn、Mo、B、Pb进行12次平行测定，并得出计算值与真实值的对数误差，所得结果如下表3。可以看出本方法有较好的准确度，证明方法可行。

① 为12次测定的平均值；wCV为标准值；Sc为测定值与标准值的对数差

3 结论

使用本方法测定多目标地质样品中的Ag、Sn、Mo、B、Pb五项元素，结合仪器的光电自动化定量分析，使分析技术指标大大提高，有效的提高了光谱多元素分析的准确度和灵敏度，缩短流程提高了分析效率。采用电弧发射光谱法一次完成多个元素的测定，具有准确度高、速度快、成本低、操作简便等优点。

参考文献

[1] 许晓洁，付军刚，贾喜英.发射光谱法测定化探样品中银锡铅硼[J].西部探矿工程，2002，14（5）：74-76.

[2] 张勤.多目标地球化学填图中的54种指标配套分析方案和分析质量监控系统[J].第四纪地质，2005，25（3）：292-297.

[3] 叶晨亮.发射光谱法快速测定银锡铜铅锌钼铍[J].岩石测试.2004，23（3）：238-240.

[4] 岩石矿物分析编写组.岩石矿物分析（第二分册）[M].北京：地质出版社 1991.187-231.

化学发光法范文5

【关键词】酶联免疫法；化学发光法；CA-125

肿瘤死亡率仅次于心血管疾病，位居全球第二，已成为严重危害人类健康的疾病，每年都有许许多多的肿瘤患被确诊，其中不少患者由于就诊晚，已出现全身严重症状，或是转移到远处，治疗效果均不佳、预后差。随着检验医学的不断发展，对肿瘤的早起诊断已经成为患者的需求，CA125是1983年由Bast等从上皮性卵巢癌抗原检测出可被单克隆抗体OC125结合的一种糖蛋白。其中健康人群中95%的成年妇女血清中CA125的水平≤35U/ml。若患者血清中CA125大于基线水平的两倍以上，就应进一步行CT、TVS等其它的物理检查以明确病因。CA125是目前研究最广泛的卵巢癌血清标志物，在早期筛查、诊断、疗效监测及预后方面的研究均有报道[1]。常用的测定方法是酶联免疫法和化学发光法等，现就这两种方法做以下对比分析：

1资料与方法

1.1一般资料选取我院2011年1月――2012年6月的86例血液标本，年龄34-62岁。

1.2仪器和试剂采用安图全自动酶标仪和Roche co base 411全自动化学发光仪，ELISA检测所用试剂盒购买于郑州博赛生物工程股份有限公司，化学发光法检测试剂盒购买于佳业公司，并按照仪器的使用说明及操作步骤规程进行。

1.3方法分别用ELISA和CLIA对每一份标本同时进行血清CA-125检测，将患者血清分装冷冻，每天对每份标本检测1次，20天连续检测，比较CA-125使用ELISA和CLIA检测的稳定性及其重复性，同时比较两种方法检测CA-125的敏感性。

3讨论

CA125是诊断卵巢癌的相关指标之一，它是一种大分子的糖蛋白，其敏感性与卵巢癌的组织学类型及临床分期密切有关，在中晚期患者血清中CA125的测定结果升高显著。国内外对CA125等指标进行了大量的临床研究，对卵巢癌的早期诊断起了重要的作用，已广泛用于卵巢癌的诊断及术后监测[2]。

化学发光现象是自然界中常见的一种自然现象，在化学反应中，物质分子在吸收化学能后形成的光辐射现象，临床上常常利用化学发光测定化学发光反应中的催化剂、反应物、抑制剂、增敏剂，这种方法通常认为是化学发光法。从本资料表明，化学发光法的敏感性比酶联免疫法好，尤其是对于低值和高值，稳定性及重复性很好。在临床检验中采用CLIA检测CA125，检测标准曲线稳定时间比较长，不需要像ELISA每批检测都要重新制作标准曲线，且ELISA存在受人工操作影响大的问题[3]，但ELISA法具有成本低廉、测定快速简便的优点，常常用于健康人群的普查及体检，因此对于受医疗条件限制医院ELISA法也是一个很好而实用的检测方法；CLIA是将发光系统与免疫反应相结合以检测抗原或抗体的方法，是继放射免疫、酶免疫、荧光免疫、化学发光免疫之后的新一代标记免疫技术，具有灵敏度高、线性范围宽、快速、应用范围广等特点。

综上所述，化学发光法的稳定性好、重复性好、敏感度高、但费用昂贵；酶联免疫法经济实用，再高值测定中的敏感性比较好，临床上要根据自己的具体情况，量力而行，情况允许的时候最好选择化学发光法。

参考文献

[1]张月存.血清CA125在上皮性卵巢癌诊断治疗中的应用[J].中国现代手术学杂志，2004，8（1）：57.

化学发光法范文6

关键词：全自动化学发光 酶联免疫吸附法 乙肝病毒抗体

中图分类号：R512.6+2 文献标识码：A 文章编号：1005-0515（2013）4-022-01

乙型肝炎是发病人群较大的乙类传染病，占我国传染病的第二大类，目前我国人群感染率高达60%[1]。HBsab是人体感染HBv后，针对HBsA生的特异性抗体。由于尚无特效的治疗方法，因此准确的早期检测血清HBsAb显得极为重要。ELISA应用最早，，也开展得最为广泛，但由于其固有的局限性，给临床诊断带来一定的误差。随着化学发光技术的发展，其在免疫学检验方面的应用日益受到人们的重视，该法具有高灵敏度、宽线性、反应快速、影响因素少、结果准确等优点。为了探讨两种检测对诊断准确性的影响，我们回顾性分析200例乙肝患者的临床资料，现报告如下：

材料与实验方法

1.1 标本来源 我院患者200例，男125例，女75例。年龄15-70岁。

1.2 仪器：YR-WASH-1型洗板机由法国ADIL提供，ELISA试剂有上海科华实业有限公司提供，全自动化学发光分析仪CHEMCLIN600及其配套试剂由北京科美生物公司提供，乙肝标志物定值质控血清购自中国卫生部临床检验中心。所有患者静脉取血，离心分离出血清待检。

1.3 实验方法 所有患者血清均分为两份，先后采用ELISA和CLIA法分别检测[2-3]，并对比检测结果。ELISA法采用双抗原夹心法，CLIA也采用双抗体夹心法。选用HBsAg含量低、中、高浓度患者阳性血清，每个浓度分20份，其中10份-冷冻保存，每天检测一次，计算批间重复性，另外10份同批检测，计算批内重复性。

1.4实验结果

ELISA法和CLIA法检测结果如表1所示，CLIA法阳性检出率为52.8%，ELISA法阳性检出率为42.3%，前着显著优势于后者（P

2 讨论

在测定乙肝患者血清HBSAg的检测方法中，ELISA法由于操作简便，快速，成本低廉，因此应用极为广泛。但由于不同厂家生产的抗原，抗体试剂有较大差异，因此带来一系列误差，容易出现较高的假阴性，并且只能定性检测，其灵敏度和重复性有待进一步提高[4]。

CLIA法采用生物素--亲和素技术，电化学发光技术和磁珠包被技术，全面实现了检测的自动化和标准化，减少了人工操作带来的误差，提高了检测方法的灵敏度，能精确的进行定性定量检测，大幅度减少了批内、批间的误差。HBsAb水平在10mIU/ml以上时才具有抵抗HBV入侵的作用，HBsAb定量在1-10mIU/ml范围时，ELISA法结果为阴性，但此时抗体对HBV并无中和作用，仍有感染HBV的危险。CLIA法可精确检出低浓度HBsAg，在病程观察中大大缩短了“窗口期”时间。可有效控制传染源。在我们的检测结果中，其检出率差异主要集中在低浓度区，而在高浓度区无显著性差异，这说明ELISA更适用于高浓度HBsAb的检测，而CLIA法的检测适用范围更广泛。

通过化学发光法检测可以减少其漏检，这对一些低浓度HBsAg携带者，特别是一些群体如医务工作者及病人家属等的检测，做好早期预防有重要的现实意义。在测定乙肝患者血 从统计结果来看，CLIA法在乙肝血清阳性检出率和重复稳定性方面均显著优势于ELISA法，且能准确的进行定性定量检测，早期发现病情，及时控制传染源，为临床治疗提供有效指导，为患者改善病情赢得时间，因此值得在临床上应用和推广。

参考文献

[1]郑怀竞，韩松，临床检验ELISA指南[M]：北京：北京医科大学中国协和医科大学联合出版社。1994：14.

[2]朱平安，电化学发光免疫分析法定量测定乙肝表面抗原的初步评价[J]。中化现代中西医杂志，2006，4（1）：16